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Il Museo vuole rappresentare e documentare la storia di Aquino e del suo antico territorio corrispondente alla media valle del fiume Liri. All'interno di questo territorio si trovano i moderni centri di Aquino, Castrocielo, Colle San Magno, Pico, Piedimonte San Germano, Pontecorvo, Roccasecca e Villa Santa Lucia. Il percorso espositivo è suddiviso in quattro sezioni cronologiche: Preistoria e Protostoria, Età Romana, Medioevo, Età Moderna. Il Museo della Città si trova nel centro del comprensorio archeologico di Aquino, tra l'area della città romana e quelle della città medievale e moderna, e a ridosso della Via Latina antica.